Comparative study of three xenic media culture for cultivation of Balantidium coli strains / Estudo comparativo entre três meios de cultivo xênicos para o cultivo de cepas de Balantidium coli

Abstract The aim of the present study was to evaluate the growth rate of Balantidium coli in three xenic media cultures. Between 2013 and 2015, 10 B. coli isolates obtained from feces of Cynomolgus macaques, and 30 isolates from feces of pigs were studied. An inoculum of 500 trophozoites was transferred to tubes containing LES, TYSGM-9 and Pavlova media. These cultures were evaluated at incubation times of 24, 48, 72 and 96 hours. In most of strains analyzed wasn't showed significant difference in the growth rate comparing TYSGM-9 and Pavlova media (Wilcoxon p>0.016). In Pavlova medium, the trophozoites showed a maximum growth at 72 hours with significant difference when compared with the times of 24 h and 96 h (Wilcoxon <0.008). In LES, viable trophozoites were observed until 24 hours, with a significant difference (Friedman p<0.05, Wilcoxon p<0.016) in the number of parasite cells compared with Pavlova and TYSGM-9 media cultures. Thus, LES medium seemed to be less adequate than the other media for maintenance of B. coli. Despite the satisfactory results in TYSGM-9, Pavlova medium was considered ideal for the maintenance of this protozoan strain, guaranteeing the viability of the parasite with subculture every three days, presenting lower costs.

Resumo O objetivo do presente estudo foi avaliar a taxa de crescimento de Balantidium coli em três meios de cultura xênicos. Entre 2013 e 2015 foram estudados 10 isolados de B. coli obtidos de Cynomolgus macaques e 30 isolados de suínos. Um inóculo contendo 500 trofozoítos foi transferido para tubos contendo os meios LES, TYSGM-9 e Pavlova. Os cultivos foram avaliados com tempos de incubação de 24, 48, 72 e 96 horas. Na maioria das cepas analisadas não foi observado diferença significativa na taxa de crescimento comparando TYSGM-9 e Pavlova (Wilcoxon p>0,016). Em Pavlova, os trofozoítos apresentaram máximo de crescimento a 72 h com diferença significativa quando se comparou com os tempos de 24 h e 96 h (Wilcoxon <0,008). Em LES observou-se trofozoítos viáveis até 24 horas com diferença significativa (Friedman p<0,05 e Wilcoxon p<0,016), na quantidade de células parasitárias, quando comparado com Pavlova e TYSGM-9. Dessa forma, o meio LES mostrou-se ser menos adequado do que os outros, para a manutenção de B. coli. Apesar do resultado satisfatório em TYSGM-9, Pavlova foi considerado ideal para manutenção do protozoário, por garantir a viabilidade do parasito com subcultivos a cada três dias, além de apresentar menor custo.

Comparison of five parasitological techniques for laboratory diagnosis of Balantidium coli cysts / Comparação de cinco técnicas parasitológicas para diagnóstico laboratorial de cistos de Balantidium coli

Abstract Balantidium coli is a protozoon that can cause dysentery in humans, pigs and nonhuman primates, with zoonotic potential. In the literature, there is still little information on the effectiveness of different laboratory techniques for diagnosing this disease. This study compared and evaluated the performance of the Lutz, modified Ritchie, Faust, modified Sheather and direct examination techniques for detecting cysts of this protozoon. Between 2012 and 2014, 1905 fecal samples were collected from captive animals in the state of Rio de Janeiro. Of these, 790 were obtained from the rectum of pigs and 1115 from enclosures occupied by nonhuman primates. B. coli cysts were most evident through direct examination (22.4% of the samples) and the Lutz technique (21%). Fair agreement (Kappa = 0.41; p < 0.05) was observed only between direct examination and Lutz. The flotation techniques (Faust and modified Sheather) did not show good recovery of cysts. A statistically significant difference (p < 0.05) in the frequency of cysts between pigs and nonhuman primates could only be observed through direct examination and the Lutz technique. The most efficient method for diagnosing this parasitosis was seen to an association between direct examination and the spontaneous sedimentation technique.

Resumo Balantidium coli é um protozoário que pode determinar disenteria em humanos, suínos e primatas não humanos apresentando potencial zoonótico. Na literatura ainda são escassas as informações sobre a eficiência das diferentes técnicas laboratoriais para o diagnóstico dessa parasitose. Este estudo comparou e avaliou o desempenho das técnicas de Lutz, Ritchie modificada, Faust, Sheather modificada e do exame direto para a detecção de cistos desse protozoário. Entre 2012 e 2014, foram coletadas 1905 amostras fecais de animais cativos no Estado do Rio de Janeiro. Dessas, 790 foram obtidas da ampola retal de suínos e 1115 dos recintos de primatas não humanos. Cistos de B. coli foram 22,4 % mais evidenciados pelo exame direto; e pela técnica de Lutz, 21% das amostras. Concordância regular (Kappa = 0,41; p < 0,05) foi observada somente entre exame direto e Lutz. As técnicas de flutuação, Faust et al. e Sheather modificada não apresentaram boa recuperação dos cistos. Diferença estatística significativa (p < 0,05) na frequência de cistos entre suínos e primatas não humanos pode ser observada somente no exame direto e na técnica de Lutz. A metodologia mais eficiente para diagnóstico dessa parasitose foi observada pela associação do exame direto e da técnica de sedimentação espontânea.